EClassical3200L超高压液相色谱仪是依利特自主研发的高性能超高效液相分析设备，专为实验室高精度、高通量、高合规性检测场景打造。设备搭载130MPa超高压输液系统，可适配亚2μm小粒径色谱柱，大幅提升复杂样品分离效率与分离度。仪器配备1秒极速进样功能，配合双通道清洗设计，有效降低样品残留与交叉污染，适合大批量连续样品检测。整机采用智能温控柱温箱设计，支持多柱放置与阀体系拓展，可满足多维色谱分析及多样化实验需求。设备采用模块化结构，支持紫外、PDA等多种检测器自由联用，流路结构稳定、峰形表现优异。配套合规数据工作站，完整满足GMP、GLP数据完整性及审计追踪要求，数据真实可靠。整体设备性能稳定、操作便捷、拓展性强，广泛适用于制药研发、药品质控、生物样本分析、食品化工及科研检测等各类精密分析场景，是国产超高压液相色谱设备的优选机型。
E3200L2D
EClassic
简介水溶性维生素 (WSV) 主要由复合维生素 B 组成，是许多食品，尤其婴儿配方奶粉的基本成分。这些维生素在代谢途径中发挥着关键作用，日常饮食摄入可以产生显著健康获益。由于美国食品药品监督管理局 (FDA) 制定了这些维生素的每日营养推荐值，因此食品和补充剂生产商以及独立检测实验室需要能够定量鉴定该类产品中的维生素含量。在进行强化食品分析时，由于维生素浓度范围较广，与每日容许摄取量保持一致尤其具有挑战性 (见表 1)。例如，在婴儿牛奶中，维生素 B12 (氰钴维生素) 的浓度为 1-2ppb，而维生素 B2 (核黄素) 的浓度则高达 1000 倍 (1-2 pm)。因此，任何定量分析方法都必须能够适应这种广泛的浓度分布。我们提出了一种 LC-MS/MS 方法，一次进样即可定量分析 B 族维生素。分析的维生素包括维生素 B1 (硫胺素)、B2 (核黄素)、B3 (烟酸)、B3*(烟酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (叶酸) 和维生素 B12 (氰钴胺)，使用三个内标。采用简单的液液萃取法从婴儿配方奶粉中提取维生素。样品提取与快速分析方法 (<6 分钟) 相结合具有稳定性 / 可靠性，并且耗时最少。实验硬件 / 软件液相色谱串联质谱分离使用 EClassical3200L-MS2Vertical 9100 液相质谱联用系统，所有仪器控制、分析和数据处理均使用液质软件平台执行。方法参数LC 和 MS/MS 方法参数分别见表 2 和表 3。溶剂、标准品和样品制备使用的所有溶剂、试剂和稀释剂均为 HPLC 级，并通过 0.22-um 尼龙针头式过滤器过滤。对于所有样品的稀释，使用 5-mM 甲酸铵，并用 10% 甲酸调整 pH 为 4.9。所有 B 族维生素标准品，包括 B1 (硫胺素)、B2 (核黄素)、B3 (烟酸)、B3*(烟酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (叶酸) 和 B12 (氰钴胺) 均从 Sigma-Aldrich Inc.,Saint-Louis,MO. 购买。为了校准和定量，使用了三个内标：维生素 B1"(硫胺素；13C4C8H17 N4OS+)、B7"(生物素；C10D2H14 N2O3 S) 和 B2'(核黄素；13C4C13H2015 N2 N2O6))，全部来自 Sigma-Aldrich Inc.。校准 B3、B3*、B6 和 B1 时采用 B1'，校准 B7、B9 和 B12 时采用 B7，校准 B2 时采用 B2。分析样品包括两种商购获得的婴儿配方奶粉，标记为 IF1 和 IF2。表 3.MS/MS 参数为了防止可能的标准品或样品不稳定性，所有储备和工作标准品均冷藏存储，直到使用；所有制备样品均在 4 小时内进行分析，并且只使用琥珀色 2mL LC 小瓶。所有标准品和样品均通过 0.22-um 尼龙过滤器过滤。实验标准品制备在 250mL 容量瓶中制备 40ug/mL 的 B2、B9 和 B7 储备标准品。由于这三种维生素在碱性条件下溶解最佳，所以首先在烧瓶中加入 50mL0.05% 氢氧化
背景烟草特有亚硝胺 (TSNAs) 是只存在于烟草、烟草制品和卷烟烟气中的一类有害物质，研究发现，烟草特有亚硝胺对人体危害性极大。据统计，在美国、西欧由烟草中亚硝胺导致的癌症发病率超过 30%，由吸烟导致的肺癌发病率高达 80%。其准确测定对正确评价吸烟对健康的危害以及推动低危害卷烟的研发具有重要意义。但是，TSNAs 在卷烟烟气中的含量很低，卷烟烟气背景复杂，含有数千种成分，所以卷烟烟气中 TSNAs 的准确定量难度很大。液质联用技术结合了色谱强大的分离功能和质谱准确的定性功能，能很好的分析痕量水平的 TSNAS，并且前处理方法简单快速，与传统的 GC-TEA 方法相比，灵敏度更高、选择性更强。故本文参考中国烟草总公司企业标准 YO/T 17-2012《卷烟主流烟气总粒相物中烟草特有 N - 亚硝胺的测定 高效液相色谱 - 串联质谱联用法》，采用 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 液相质谱联用系统对卷烟主流烟气中的特有 N - 亚硝胺进行测定，其四种物质的定量限完全满足并在灵敏度和检测速度优于标准的检测需求。实验方法卷烟抽吸按照 GB/T19609 抽吸卷烟，使用直线式吸烟机，采用 44mm 滤片收集 5 支卷烟的总粒相物。样品萃取将滤片置于 50mL 锥形瓶中，准确加入 15.0mL 含有 10.0ng/ml 混合内标的 0.1mol/L 乙酸铵萃取溶液；超声萃取 30min 后，静置 5min。取适量萃取液过 0.22um 水相滤膜，移至色谱分析瓶中进行 HPLC-MS/MS 分析。LC-MS/MS 仪器方法依利特科技 EClassical 3200L 参数:色谱柱：SinoPak BEH T-C18 1.8μm 2.1×100mm柱温：45℃流速：0.4mL/min进样量：10μL表 1 液相色谱梯度洗脱表质谱参数以下参数以依利特科技 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 三重四极杆质谱仪为例，离子源参数及目标化合物质谱参数见表 2 和表 3。表 2 质谱离子源参数表 3 化合物质谱参数列表结果与讨论本文方法优化了色谱柱的选择，由于该类化合物偏碱性，常规封端较弱的 C18 色谱柱会稍有拖尾现象，最终选择了采用 BEH 色谱柱，可以得到较好的峰形。另外，因为该类化合物含有电负性较强的氮原子，故采用 ESI + 模式进行测定。流动相通过添加不同浓度的甲酸和缓冲盐后的信号对比后，发现采用水和甲醇做为流动相可以得到较高的灵敏度和良好的色谱峰形，如下图 1 显示，各化合物的峰型对称，每个色谱峰上都有足够的采集点数，可以获得准确的结果及优异的重复性，满足现有标准的检测要求。经过进一步色谱条件优化后其定量限可达到 0.01ng/ml，图 2 中展示了 4 个化合物在 0.01ng/ml 浓度时的提取离子流色谱图。采用 0.1mol/L 乙酸铵溶液稀释成 1ng/mL-20ng/mL 的系列校准标准溶液，并绘制标准曲线，
