目录

第 1 章 肉制品中人工合成着色剂检测 1

1.1 前言 1

1.2 仪器设备与试剂 2

1.3 实验方法 3

1.4 实验结果 5

1.5 结论 10

1.6 参考文献 10

第 2 章 肉制品中苯并 (a) 芘检测 11

2.1 前言 11

2.2 仪器设备与试剂 12

2.3 实验方法 13

2.4 实验结果 14

2.5 参考文献 14

第 3 章 肉制品中四环素类抗生素检测 15

3.1 前言 15

3.2 仪器设备与试剂 15

3.3 实验方法 16

3.4 实验结果 17

3.5 结论 20

第 4 章 肉制品中药物残留检测 21

4.1 前言 21

4.2 肉制品中氯霉素残留分析实例 21

4.3 肉制品中呋喃唑酮残留分析实例 21

4.4 肉制品中呋喃它酮残留分析实例 22

第 1 章 肉制品中人工合成着色剂检测

1.1 前言

1.1.1 什么是人工合成着色剂

人工合成着色剂主要以苯、甲苯等化工产品为原料，经过磺化、硝化、卤化、偶氮化等一系列有机反应而制得的人工色素。合成着色剂能有效改善食品色泽，被广泛应用于食品加工中，中国食品添加剂使用卫生标准列入的合成色素主要有胭脂红、苋菜红、日落黄、赤藓红、柠檬黄、新红、靛蓝、亮蓝等等。

1.1.2 合成着色剂的性质

合成着色剂可分为偶氮类和非偶氮类两种结构。在酸碱条件下，两种结构的合成着色剂均稳定。按着色剂的溶解性可分为脂溶性着色剂和水溶性着色剂，脂溶性着色剂由于不溶于水，在体内不易排出，毒性较大等原因，在食品行业已经不允许添加，现在世界各国使用的合成着色剂大部分为水溶性偶氮类着色剂。

1.1.3 合成着色剂的毒性

在肉制品生产中，着色剂虽然可以改变肉制品的色泽，增加消费者的购买欲和食欲，然而它也可以掩盖肉制品中不新鲜原料肉，成为不法销售者获取非法利益的手段。合成着色剂少量食用可经肝肾代谢排出体外，但是若长期或一次性大量食用色素含量超标的食品，可能会引起过敏、腹泻等症状，因而各国都严格控制合成着色剂的使用范围和使用量。肉制品中柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红着色剂被列为禁用，而诱惑红限用于西式火腿类、肉灌肠类和可食用动物肠衣类食品。

本实验参考 GB/T 9695.6-2008《肉制品 胭脂红着色剂测定》以及 GB2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》，采用依利特公司生产的高效液相色谱仪，对着色剂标准品、线性以及加标回收率等进行检测方法验证，并且检测实际肉制品中柠檬黄、胭脂红、日落黄、苋菜红、诱惑红的添加情况。

1.2 仪器设备与试剂

实验过程中其它玻璃器皿还包括棕色容量瓶 (50mL、100mL)、移液枪 (0~1000µL)、移液枪枪头 (1mL、5mL)、一次性 PVC 手套、一次性口罩、50mL 塑料离心管、10mL 塑料离心管等若干。

1.3 实验方法

1.3.1 试剂及相关溶液配制

0.02mol/L 乙酸铵溶液：称取 1.54g 乙酸铵样品于 1000mL 水中充分溶解后，经 0.45µm 滤膜过滤后备用。

甲醇 - 甲酸溶液：量取甲醇 60mL，甲酸 40mL，混合均匀即得。

乙醇 - 氨水溶液：量取无水乙醇 70mL，氨水溶液 20mL、水 10mL，混合均匀即得。

5% 氨化甲醇溶液：取氨水 5mL，加入甲醇至 100mL 即得。

混标储备液：准确称取柠檬黄、胭脂红、日落黄、苋菜红、诱惑红标准品各 10mg，至 100mL 容量瓶中，用水溶解后定容即得 100µg/mL 的混标溶液。

标准混合工作液：移取不同体积的混标溶液，用流动相稀释，得到的浓度分别为 100µg/mL、50µg/mL、40µg/mL、20µg/mL、10µg/mL、5µg/mL、1µg/mL。

1.3.2 样品前处理

将切碎的肉样，用打肉机将肉搅成糊状，并用均质机对肉制品进行均质化后，精密称取一定量的样品 2.0g（精确至 0.01g），置于 50mL 离心管中，加入 20mL 石油醚，涡旋 1min 后，5000r/min 离心 5min，弃去石油醚上清液，重复操作一次。

氮气吹干剩余石油醚，加入 5mL 乙醇 - 氨水溶液涡旋 1min，超声 30min，以 10000r/min 的速度离心 5min，移取上清液至 10mL 离心管中，重复操作一次，合并上清液。

上清液 75℃下氮气吹至 2mL 左右，水洗转移至 10mL 离心管中，用柠檬酸调节 pH 值至 6 左右，取 8mL 样品上 SPE 小柱待净化。

SPE 小柱的活化与净化：

活化：聚酰胺 PA-1（6mL/500mg）经 5mL 甲醇和 5mL 纯化水活化后，上样。

上样和洗脱：先用 2mL 纯化水冲洗，然后用 2mL 甲醇 - 甲酸溶液冲洗，抽干小柱，用 5mL 5% 的氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，于 65℃条件下氮气吹干后，用 1mL 流动相溶解定容后，经 0.45µm 滤膜过滤，取溶液 10µL 进样。

1.3.3 色谱条件

流动相：A:0.02mol/L 乙酸铵溶液，B: 甲醇（梯度洗脱）

色谱柱：Supersil ODS2 5µm 4.6×250mm

柱温：35℃

流量：1.0mL/min

进样体积：10μL

1.4 实验结果

1.4.1 着色剂标准品分析结果

1.4.2 系统重复性

从各目标化合物连续七针的保留时间结果可知，系统的重复性良好，可以保证数据的重复性和准确性。

1.4.3 标准品线性相关性

配制浓度分别为 0.2µg/mL、0.4µg/mL、0.8µg/mL、2.0µg/mL、4.0µg/mL、8.0µg/mL、20.0µg/mL 的着色剂混标工作液，按浓度由低至高进样，以标准品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制校准曲线，着色剂的标准溶液线性相关性结果如下。

1.4.4 小检出限

本系统的基线噪声为 25µV，根据 3 倍信噪比，仪器的小检出限分别为柠檬黄 20ng/mL，苋菜红 22ng/mL，胭脂红 33ng/mL，日落黄 20ng/mL，诱惑红 17ng/mL。根据前处理方法计算，各目标物的方法检出限分别为柠檬黄 12.5µg/kg，苋菜红 13.8µg/kg，胭脂红 20.6µg/kg，日落黄 12.5µg/kg，诱惑红 10.6µg/kg。

1.4.5 加标回收率

采用方法中描述的前处理过程，对空白、猪肉样品以及加标样品进行处理后，采集数据，并计算所对应的加标回收率结果见表 1-10。

1.4.6 实际样品分析

按照上述方法对市场上的几种肉制品中着色剂的含量情况分析结果如下：

完整方案（PDF 版）下载提示

上述内容为《肉制品检测 HPLC 解决方案》前 10 页核心内容，完整 PDF 文档还包含以下关键信息，点击链接即可获取：

后续章节详情：第 1 章剩余内容（结论、参考文献）、第 2 章（肉制品中苯并 (a) 芘检测）至第 4 章（肉制品中药物残留检测）的完整实验方法、结果及结论；

高清资料：所有章节谱图（图 1-1 至图 3-3）高清版（含峰形放大细节、基线噪声标注）、实际肉制品样品（午餐肉、火腿、烤肠）检测原始谱图；

验证数据：苯并 (a) 芘、四环素类抗生素、药物残留（氯霉素、呋喃唑酮等）的线性方程、检出限 / 定量限报告、加标回收率数据（87%-106%）、精密度验证结果（RSD＜7%）；

操作指南：固相萃取 / 索氏提取操作视频、色谱柱活化与维护教程、样品均质化实操演示；

附录文件：GB/T 9695.6-2008、GB 5009.116-2003 等标准原文节选、仪器操作安全规范、耗材订货清单（色谱柱、试剂、滤膜型号编码）。

下载通道

直接下载：www.elitehplc.com/ 肉制品检测 HPLC 解决方案

技术咨询：400-66-35483