背景

灭螨醌是一种重要的合成杀螨剂农药，用来控制虱类、螨类和其他无脊椎动物的杀虫剂，羟基灭螨醌是其代谢产物，具有高效、低毒、广谱和生物降解性等特性，在国内外广泛使用。

欧盟、日本、加拿大及美国等国家和地区对水果中灭螨醌残留量都有严格的限量要求，大残留量（MRLs）为灭螨醌及其代谢物羟基灭螨醌的混合残留总量。具体限量如下：

欧盟：苹果和梨中为 0.1mg/kg，橙子为 0.4mg/kg；美国：葡萄中为 1.6mg/kg；我国：标准 SN/T 4066-2014 测定低限为 0.005mg/kg。

本文参考 SN/T 4066-2014《出口食品中灭螨醌和羟基灭螨醌残留量的测定 液相色谱 - 质谱 / 质谱法》，采用依利特科技的 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 三重四极杆液质联用系统建立了食品中灭螨醌和羟基灭螨醌的检测方法。该仪器利用 QSight 独特的双离子源技术，同时配备 ESI 和 APCI 双离子源，具有各自独立的气路和加热系统（见图 1），无需手动更换离子源，只需在软件中一键切换即可满足不同检测模式需求，操作简单快速。同时前端配备的超高压液相色谱，可高效分离两种化合物，且灵敏度高、重复性好，完全满足茶叶等食品中灭螨醌和羟基灭螨醌的限度检测要求。

实验方法

样品处理（参考标准 SN/T 4066-2014）

1. 试样准备

取茶叶样品约 500g，经食品粉碎机粉碎并通过 2.0mm 圆孔筛，混匀后装入洁净容器内密封，于 0°C~4℃保存，备用。

2. 提取

准确称取 2.5g（精确到 0.01g）茶叶试样于 50mL 离心管中，加入 5mL 水、0.02mL 甲酸后放置 0.5h；加入 15mL 甲酸 - 乙腈溶液（0.5% 甲酸），用均质器在 12000r/min 高速匀浆 1min；加入 2g 氯化钠，旋涡混匀后于 7000r/min 离心 5min，吸取上层有机相于 25mL 容量瓶中。

残渣中加入 10mL 甲酸 - 乙腈溶液（0.5% 甲酸）重复提取一次，合并上层有机相并定容至 25mL。转移 5mL 有机相至试管中，在 40℃条件下氮吹浓缩至近干，待净化。

3. 净化

以 2mL 弗罗里硅土柱洗脱液【100mL 正己烷 - 丙酮（体积比 80+20）中加入 0.5mL 甲酸】分两次洗涤试管中残留物，并全部转入活化后的弗罗里硅土固相萃取柱中，用刻度试管收集，控制流速不超过 1 滴 /s。待溶液全部流出后，加入 10mL 洗脱液洗脱，收集全部洗脱液，于 40℃氮吹至近干。用乙腈溶解并定容至 1mL，过 0.22μm 有机滤膜后上机测定。

LC-MS/MS 仪器方法

1. 色谱条件

色谱柱：Quasar C18，100×2.1mm，3μm，货号：N9308812（原文提及 “Supersil ODS2 2.1×100，3μm”，以实际检测用 Quasar C18 柱为准）；流动相：A 为 50% 甲醇水（含 0.5% 甲酸），B 为乙腈（含 0.5% 甲酸）；柱温：40℃；流速：0.5mL/min；进样量：10μL；

2. 质谱参数

采用 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 三重四极杆液质联用系统进行分析，离子源参数及目标化合物质谱参数见表 2 和表 3。

表 3 化合物的质谱参数列表

结果与讨论

1. 分离与灵敏度

该方法一针进样即可快速测定灭螨醌和羟基灭螨醌两种物质，实现了较好的分离效果，峰形优异且灵敏度高。MRM 叠加谱图（图 2）显示，两化合物峰型对称，每个色谱峰上有足够的采集点数，可确保结果准确及重复性优异（5ng/mL 浓度下）。

2. 线性关系

采用流动相 B 稀释标准溶液，配制浓度为 1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL 的标准系列，以待测化合物定量离子对峰面积为纵坐标、浓度为横坐标制作标准曲线（图 3）。结果显示，在 1ng/mL~100ng/mL 浓度范围内，两种化合物的线性关系均极佳，线性相关系数 R² 均大于 0.999。

根据灭螨醌的结构特点，对比了稀释溶剂为乙腈和含0.5%甲酸的乙,腈溶液时的标准品响应情况谱图及峰面积结果，见下图4和表4,故采用两种稀释剂均可，无需加入甲酸。

同时考察了该方法的仪器检出限情况，在0.5ng/ml的浓度下，羟基灭螨醒和灭螨醒的的信噪比分别为11和12，如下图所示，可见该方法灵敏度较高，完全满足该标准的检出要求。

结论

本文采用 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 三重四极杆液质联用系统，建立了快速、高灵敏度且可靠的 LC-MS/MS 方法，用于测定食品中灭螨醌和羟基灭螨醌，为该类化合物提供了高通量检测手段，检出限完全满足相关标准要求。灭螨醌：y=530.50x-108.91355，R²=0.99962；羟基灭螨醌：线性方程及 R² 详见完整谱图，R²≥0.999）

3. 稀释剂影响

对比乙腈与含 0.5% 甲酸的乙腈溶液作为稀释剂时的标准品响应（图 4、表 4），结果显示两种稀释剂对峰面积影响较小（灭螨醌 RSD=0.86%，羟基灭螨醌 RSD=3.53%），因此无需额外添加甲酸，两种稀释剂均可使用。

完整方案（PDF 版）下载提示

上述内容为《双离子源 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 液相质谱联用系统高效应对 APCI 模式 测定食品中灭螨醌和羟基灭螨醌含量》核心摘要，完整 PDF 文档包含以下关键内容，点击链接即可获取：

高清原图包：MRM 提取离子谱图、标准曲线完整图谱、不同稀释剂色谱对比图（含原始数据标注）；

方法验证全数据：精密度（连续 6 针进样 RSD＜2%）、加标回收率（茶叶样品加标回收率 85%-105%）、稳定性测试（室温放置 8h 峰面积变化＜3%）；

实操指南：弗罗里硅土柱活化步骤、质谱离子源参数优化技巧、样品前处理常见问题解决方案；

仪器操作视频：双离子源一键切换演示、LC-MS/MS 系统开机校准流程。

下载通道

直接下载：www.eliteHPLC.com/ 食品灭螨醌检测液质联用方案

技术咨询：400-66-35483