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反相UHPLC-MS/MS分析保健食品中的脂溶性维生素
简介维生素是人体内各种代谢功能所必需的微量营养素。维生素可分为水溶性和脂溶性维生素。脂溶性维生素 (FSV) 主要由维生素 A、D、E 和 K 组成，储存在肝脏和脂肪组织中，消除速率比水溶性维生素慢。因此，人体不需要经常补充 FSV。FDA 建议人体 FSV 推荐摄入量 / 耐受量见表 1。由于脂溶性维生素的溶解度有限，食品、食品添加剂和补充剂中的 FSV 一般主要采用正相液相色谱法进行分析，在样品制备和后续色谱分析中通常使用二氯甲烷作为主要有机溶剂。但是由于与所用溶剂有关的固有危害，以及较高处置成本，这种方法可能并不理想。当使用反相液相色谱法 (RPLC) 时，将脂溶性维生素溶解到适当溶剂中是一项挑战。还必须考虑到任何额外的样品步骤将增加分析时间。此外，通过 RPLC 分析脂溶性维生素时，由于二氯甲烷常被用作样品稀释剂，所以避免因溶剂效应而导致的早期洗脱物出现色谱峰变形是一项重大挑战。基于上述考虑，本文提出了分析物在 100% 二氯甲烷中溶解 / 稀释并通过反相 UHPLC-MS/MS 分析 FSV 的一种方法。实验溶剂和标准品使用的所有溶剂、试剂和稀释剂均为 HPLC 级或更高。所有稀释均使用 HPLC 级二氯甲烷。FSV 标准品，包括维生素 A 醋酸酯 (视黄醇醋酸酯)、D3 (胆钙化醇)、D2 (麦角钙化醇)、K2 (甲基萘醌)、E (生育酚)、E 醋酸酯 (生育酚醋酸酯)、K1 (叶洛醌) 和 A 棕榈酸酯 (视黄醇棕榈酸酯)，均从密苏里州圣路易 Sigma-Aldrich Inc. 获得。使用二氯甲烷制备 100μg/mL FSV 工作标准品。为了防止标准品不稳定，所有储备和工作标准品均冷藏 (4°C) 存储，并且只使用 2mL 琥珀色 LC 小瓶。硬件 / 软件色谱分离使用依利特科技 UHPLC 系统及依利特科技 MS2 Vertical 9100 液相质谱联用系统检测器。所有仪器控制、分析和数据处理均使用软件平台进行。方法参数LC 和 MS/MS 方法参数分别见表 2、表 3、表 4。结果和讨论如图 1 所示，在不到 15 分钟的时间内实现了 8 种维生素良好色谱分离，如图 2 所示，5 次重复检测的重叠显示了出色的色谱重现性。三组 10 次重复进样使用二氯甲烷制备的 100μg/mL FSV 标准品，所有峰面积的 % RSD 均小于 3%(表 5)。这表明进样之间拥有出色的重现性。结论通过减少 LC 进样量和提高所使用色谱柱的内径，反相色谱法可直接应用于二氯甲烷中制备的脂溶性维生素分析，并且不会因溶剂效应导致的早期洗脱分析物色谱峰失真而造成色谱性能损失。获得的面积 % RSD<3%，表明方法重现性出色。结果表明，该方法适用于脂溶性维生素的反相 UHPLC-MS/MS 分析。参考U.S. Food and Drug Administration (FDA), Guidance for Industry: A Food Labeling Guide (14. Appendix F
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动物源食品中十三种β-受体激动剂 LC-MS/MS分析方法
前言瘦肉精是一类药物的统称，任何能够抑制动物脂肪生长，促进瘦肉生长的物质都可以称为 “瘦肉精”。此类功能的物质主要是一类叫做 β- 受体激动剂（也称 β- 兴奋剂）的药物，这类药物进入动物体内后能够改变养分的代谢途径，促进动物肌肉生长，尤其是促进骨骼肌蛋白质的合成，加速脂肪的转化和分解，提高瘦肉率。自 2011 年以来，因食用被 “瘦肉精” 污染的食物导致中毒事件屡有发生，且后果极其严重，引起了世界各国的高度重视。为了保证畜产品质量安全，保护人类健康，本文建立依利特 MS2 Vertical 9100 液质联用系统检测动物源食品中十三种 β- 受体激动剂的分析方法。提取与净化称取 2.0g（精确到 0.01g）经捣碎的样品于 50mL 离心管中，加入 8mL 乙酸钠缓冲液，充分混匀，再加 50μLβ- 葡萄糖醛甙酶 / 芳基硫酸酯酶，混匀后，37° 水浴水解 12h。添加 100μL 10ng/mL 的内标工作液于待测样品中，加盖置于水平振荡器振荡 15min，离心 10min（5000r/min），取 4mL 上清液加入 0.1mol/L 高氯酸溶液 5mL，混合均匀，用高氯酸调节 pH 值到 1±0.3。5000r/min 离心 10min 后，将全部上清液（约 10mL）转移到 50mL 离心管中，用 10mol/L 的氢氧化钠溶液调节 pH 值到 11。加入 10mL 饱和氯化钠溶液和 10mL 异丙醇 - 乙酸乙酯（6+4）混合溶液，充分提取，在 5000r/min 下离心 10min。转移全部有机相，在 40° 水浴下用氮气将其吹干。加入 5mL 乙酸钠缓冲液，超声混匀，使残渣充分溶解后备用。将阳离子交换小柱连接到真空过柱装置。将上述残渣溶液上柱，依次用 2mL 水、2mL2% 甲酸水溶液和 2mL 甲醇洗涤柱子并彻底抽干，后用 2mL 的 5% 氨水甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。流速控制在 0.5mL/min。洗脱液在 40° 水浴下氮气吹干。准确加入 200μL 0.1% 甲酸水溶液 / 水 - 甲醇溶液（95+5），超声混匀，将溶液转移到 1.5mL 离心管中，15000r/min 离心 10min。上清液待 LC-MS/MS 测定。LC-MS/MS 仪器方法液相色谱和质谱参数分别参见表 1、2 和 3实验结果在上述实验条件下得到的十三种 β- 受体激动剂的典型 MRM 色谱图见图 1。十三种 β- 受体激动剂的药物可以实现色谱分离且峰形良好，经过优化的梯度可以和基质干扰分开。十三种 β- 受体激动剂在 0.05μg/L-5μg/L 浓度范围内均呈现良好的线性关系，相关系数≥0.995，典型代表化合物克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的标准曲线（内标法）见图 2。结论依利特 MS2 Vertical 9100 MS2 Vertical 9100 9100 系统可有效检测动物源食品中十三种 β- 受体激动剂残留，方法灵敏度高、重复性好，符合相关检测要求。参考文献[1. 前处理方法参考 GB/T22286-2008《动物源性食品中多种 β
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MS² Vertical 9100液相质谱联用系统方法分析番茄
一、方案背景与目标新鲜农产品的游离氨基酸特征谱可反映其营养价值（如支链氨基酸助力运动后恢复）与风味特征（如 L - 谷氨酸呈鲜味、L - 甘氨酸呈甜味），是育种项目关注的核心性状。本方案旨在提供一种无需衍生化、样品制备简单的 LC/MS/MS 方法，实现番茄匀浆中游离氨基酸的精准定量分析。二、核心仪器与试剂1. 仪器设备分析系统：EClassical 3200L 高效液相色谱仪 + MS² Vertical 9100 三重四极杆质谱仪控制与数据处理软件：Simplicity™ M 3Q 软件平台辅助设备：3kDa 过滤器、离心机、Triple Red 水纯化仪2. 主要试剂乙腈、甲酸、氨基酸标准品、氘化氨基酸标准品（内标）、去离子水（由 Triple Red 水纯化仪制备）三、实验流程1. 方法转移与参数优化将 Syngenta 氨基酸含量测定内部方法直接转移至 EClassical 3200L 系统，无需修改；通过注入高浓度标准溶液（L1 级），优化 MS/MS 离子对的入口电压与碰撞能量。2. 校准曲线制备配制 7 点校准曲线，包含多种浓度的目标氨基酸与固定浓度的氘化内标（内标浓度见表 1）；内标种类：2,3,3,3-d4 - 丙氨酸、柠檬酸 - 2,2,4,4-d4、DL - 谷氨酸 - 2,3,3,4,4-d5、DL-d5 - 苯丙氨酸等。3. 样品前处理番茄样品匀浆后离心，取上清液；用 3kDa 过滤器过滤上清液，所得液体用去离子水稀释 400 倍（确保浓度在校准范围内）；加入与校准标准品同水平的氘化内标。4. 分析参数设置LC 参数：柱温 30℃；流动相 A 为 “水 + 0.2% 甲酸”，流动相 B 为 “乙腈 + 2% 水 + 0.2% 甲酸”；梯度洗脱程序按时间调整流速与 A/B 比例（详见表 2）；质谱参数：ESI 离子源（正电压 5500V、负电压 - 4000V），离子源温度 315℃，HSID 温度 200℃，干燥气 60，雾化气 350；各氨基酸离子对与碰撞能量见表 3。四、方案结果分离与灵敏度：该方法可实现不同游离氨基酸的良好色谱分离，MS² Vertical 9100 质谱检测器灵敏度高，能精准捕捉目标化合物信号；线性与检出限：所有氨基酸线性相关系数 R² 均 > 0.98（部分如天门冬酰胺 R²=0.999），LOQ（定量限）低（低 0.005μg/mL，如组氨酸、甜菜碱、脯氨酸等），满足微量分析需求（详见表 5）；代表性数据：天门冬酰胺、丝氨酸等氨基酸的校准曲线线性优异（见图 1），不同浓度校准品与番茄样品的色谱图重叠度高，分离效果清晰（见图 2）。五、方案结论Syngenta 内部方法可直接转移至依利特 EClassical 3200L-MS² Vertical 9100 系统，无需修改，适用性强；方法无需对游离氨基酸进行衍生化，样品前处理简单、效率高；所有目标化合物检测选择性好、灵敏度高、线性关系优异，可高效用于番茄匀浆中游离氨基酸的定量分析。注：更多详情（含
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化工消费品LCMSMS解决方案
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高效液相色谱仪在高教领域的应用
目录1. 第 1 章 公司介绍 - 1· 1.1 历史与背景 - 1· 1.2 创新与实力 - 1· 1.3 产品与市场 - 1· 1.4 地位与影响力 - 1· 1.5 未来展望 - 12. 第 2 章 产品介绍 - 2· 2.1 产品范围 - 2· 2.2 产品系列 - 23. 第 3 章 客服支持 - 3· 3.1 三级维修体系 - 34. 第 4 章 应用实例 - 4· 4.1 联合实验室方案 - 4· 4.2 用户实例 - 7· 4.3 高校用户 - 9第 1 章 公司介绍苏州依利特科技有限公司（简称 “依利特科技”），是一家专注于液相色谱等科学仪器研发、生产与销售的高新技术企业。1.1 历史与背景依利特科技的历史可追溯至上世纪 90 年代初，其前身是大连依利特科学仪器有限公司。在几代研发人员的不懈努力下，公司逐步掌握液相色谱核心技术，并于 1993 年成功推出中国第一台商品化高效液相色谱仪（HPLC）及第一批商品化液相色谱柱，打破了国外品牌在该领域的市场垄断格局。1.2 创新与实力依利特科技始终以技术创新为核心驱动力，持续推动产品技术升级与新产品研发。公司已通过 ISO9001 质量管理体系、知识产权管理体系及售后服务体系认证，同时布局逾百项核心专利，实现液相色谱核心部件 100% 自主知识产权化，且零部件国产化比例达 95% 以上。1.3 产品与市场依利特科技的产品线覆盖实验室理化分析、新兴生物技术上游纯化、临床分析诊断等多个领域，主要产品包括： · 1100/3100/3200/3200L 系列高效液相色谱仪· 色谱工作站软件· MS² Vertical 9100 三重四极杆质谱仪· 气相色谱仪· 制备纯化色谱系统· 计量泵· 色谱柱及其配件 凭借高性能、高稳定性与高成本效益，依利特科技的液相色谱产品在国产品牌中的市场占有率长期稳居前列。产品不仅获得国内市场广泛认可，还成功远销欧美、非洲、拉丁美洲、东南亚、中东及中亚等地区。1.4 地位与影响力依托扎实的技术积累、过硬的产品质量及广泛的客户认可，“依利特” 已成为国产液相色谱领域的龙头品牌。作为国家标准制定牵头企业，公司主持起草《GB/T 26792-2019 高效液相色谱仪》等多项 HPLC 国家标准，为国产液相色谱事业发展作出突出贡献。 此外，公司多次牵头或参与 “九五” 至 “十四五” 期间国家科技部重大科研项目，先后荣获中国分析测试协会 BCEIA 金奖、中国仪器仪表行业协会 CISILE 自主创新金奖、“国产好仪器”、“专家之选仪器”、2023Venture50 - 新芽榜唯一科学仪器上榜单位等荣誉，市场开拓与品牌推广能力在同行业中处于地位。1.5 未来展望依利特科技将继续秉承 “创新驱动，质量为先” 的经营理念，深化与国内外知名企业的合作，持续丰富产品组合，为全球客户提供更优质的产品、服务及解决方案，进一
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依据GB 5009.296-2023，2D-LC方法测定食品中的维生素D
维生素D（VD）是维持人体钙磷代谢平衡的关键营养素，其缺乏可导致儿童佝偻病和成人骨质软化症。食品中VD主要以VD2（麦角钙化醇）和VD3（胆钙化醇）形式存在，两者结构高度相似（仅侧链双键位置不同），传统HPLC（一维）难以实现完全分离，易导致定量误差。本文基于EClassical 3200 HPLC/3200L UHPLC构建二维液相色谱系统（2D-LC），结合GB 5009.296-2023《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》（第二法）要求，实现对食品中VD2和VD3的高效、精准检测。2D-LC，突破传统HPLC（一维）分离瓶颈与传统HPLC的对比工作流程测定维生素D的2D-LC流程如下图所示。利用KromStation色谱工作站实现系统自动化分析。流程说明：① 除杂质：样品进入一维柱，非目标组分排至废液② 富集：阀切换至富集柱，捕获目标VD组分。③ 分析：目标组分转移至二维柱，实现VD2/VD3分离。方法优势在线净化：一维柱可充当净化柱，去除蛋白质和脂质，替代繁琐的液液萃取/固相萃取。中心切割技术：精准转移目标窗口（20.2–21.5 min），避免非目标组分干扰。自动化分析：KromStation色谱工作站控制下，通过切换阀自动完成富集、转移与分离，减少人为误差。色谱条件方法性能验证分离效果2D-LC的一维中仅出现一个VD峰，表明VD2 与VD3并没有被分开；而在二维中，VD2和VD3的色谱峰有着良好的基线分离。VD一维色谱图VD二维色谱图（两个色谱峰分别为VD2 与VD3）方法精密度（n=7）与国标 GB 5009.296-2023的符合性分析GB 5009.296-2023 第二法“在线柱切换-二维液相色谱法”明确要求：1、需采用二维色谱系统实现VD2与VD3的分离，分离度≥1.5。2、方法精密度（RSD）应≤5%。3、需具备在线净化与富集功能，减少前处理误差。依利特方案完全满足上述要求。1、分离度（1.809~2.121）优于国标阈值，确保定性准确性。2、保留时间与峰面积 RSD 均低于国标限值，重复性稳定。3、在线阀切换与富集功能符合标准中“自动化净化”要求，与国标规定的技术路线一致。结论依利特二维液相色谱系统成功解决了食品基质中VD2/VD3同分异构体的分离难题。该方案在婴幼儿配方食品、乳制品等VD强化食品检测中具有重要应用价值，为食品安全监管提供可靠技术支撑。
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MS²Vertical 9100在司法刑侦领域中常见滥用药物分析解决方案
背景药物滥用（物质滥用）指非医疗目的反复、大量地使用具有依赖特性的药物（或物质），使用者对此类药物产生依赖（瘾癖），强迫和无止境地追求药物的特殊精神效应，由此带来严重的个人健康与公共卫生和社会问题。将具有依赖性的药物（或物质）分为两大类：一类是麻醉药品，如海洛因、大麻和大麻脂、阿片和吗啡制剂、可待因等；另一类是精神药物，如各种致幻剂和四氢大麻酚、中枢兴奋剂、巴比妥类药物、苯二氮卓类药物等。在 2016 年国家药物滥用监测年度报告中滥用物质（药物）前五位为 “冰毒”（占 47.9%）、海洛因（占 45.0%）、“麻谷丸”（占 7.2%）、“K 粉”（占 2.5%）和美沙酮口服液 / 片（占 1.2%）。药物滥用日常监测工作已成为我国麻醉药品、精神药品管理和禁毒工作的重中之重。样品前处理方法（唾液、尿液和血液样品）量取 0.5mL 混匀的试样，置于 10mL 具塞塑料离心管中，加入 2mL 乙腈，涡旋混匀 2min，以 6000 rpm 下离心 3min。取上清液过 0.22μm 滤膜，待 LC-MS/MS 检测。* 视样品实际情况进行氮吹浓缩处理。LC-MS/MS 仪器方法3200L 参数色谱柱：Supersil Coreshell BP柱温：40℃流速：0.35mL/min进样量：2μL2. 质谱参数MS2 Vertical 9100，目标化合物质谱参数见表 2 和表 3。3. 结果与讨论图 1 中展示了采用目标化合物浓度为 10.0μg/L 的提取离子色谱图。各个化合物的峰型对称，获得优异的色谱分离效果，仅需 4.5min 即可完成目标化合物的分离，大大提高分析效率。4. 结论MS2 Vertical 9100 建立了快速、高灵敏度和可靠的 LC-MS/MS 实验方法测定常见 44 种滥用药物的含量。实验结果表明，本方法具有分析速度快、线性范围宽和灵敏度高等特点，适用于司法刑侦领域中常见滥用药物的定性定量分析。5. 参考文献[1] SF/Z JD0107005-2016 血液、尿液中 238 种毒（药）物的检测注：更多详情 请下载 PDF 文件查看。
