饮品中着色剂 HPLC检测解决方案

作者:依利特

来源:技术专员 时间:2025-09-23 11:12:43

目录

1 前言 ........................................................................................................................... 1

2 仪器设备与试剂 ............................................................................................................... 2

3 实验方法 ........................................................................................................................... 3

4 实验结果 ........................................................................................................................... 4

5 结论 ................................................................................................................................... 7

6 参考文献 ........................................................................................................................... 7

7 附录 ................................................................................................................................... 8

1 前言

1.1 什么是着色剂

着色剂又称食品色素,是以食品着色为主要目的,使食品赋予色泽和改善食品色泽的物质。

目前世界上常用的食品着色剂有 60 余种,我国允许使用的有 46 种,按其来源和性质分为食品合成着色剂和食品天然着色剂两类:


  • 天然着色剂:主要是指由动、植物组织中提取的色素,常用的有辣椒红、甜菜红、红曲红、胭脂虫红、高粱红、叶绿素铜钠、姜黄、栀子黄、胡萝卜素、藻蓝素、可可色素、焦糖色素等。
  • 合成着色剂:主要以苯、甲苯等化工产品为原料,经过一系列反应制成。中国食品添加剂使用卫生标准列入的合成色素主要有胭脂红、苋菜红、日落黄、赤藓红、柠檬黄、新红、靛蓝、亮蓝等。与天然色素相比,合成色素颜色更鲜艳、不易褪色、价格较低,但长期大量使用可能对身体造成伤害,因此需对其添加量进行检测。

1.2 合成着色剂的性质

合成着色剂可分为偶氮类和非偶氮类两种结构,在酸碱条件下均稳定;按溶解性可分为脂溶性和水溶性,其中脂溶性着色剂因不溶于水、体内不易排出、毒性较大,已不允许在食品行业添加,目前世界各国使用的合成着色剂多为水溶性偶氮类着色剂。

1.3 合成着色剂的毒性

合成着色剂少量食用可经肝肾代谢排出体外,但长期或一次性大量食用含量超标的食品,可能引发过敏、腹泻等症状;摄入量过大时,会在体内蓄积,对肾脏、肝脏造成伤害。胭脂红等染色剂还可能降低人体免疫力、增加癌症发病率,因此饮品中着色剂的使用需控制在合理范围,其含量检测具有重要意义。

本实验参考 GB/T 21916-2008《水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法》GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》,采用大连依利特公司生产的高效液相色谱仪,对着色剂标准品、线性及加标回收率等进行检测方法验证,并检测实际饮品中柠檬黄、胭脂红、日落黄的添加情况。

2 仪器设备与试剂

3 实验方法

3.1 试剂及相关溶液配制

  1. 0.02mol/L 乙酸铵溶液:称取 1.54g 乙酸铵样品于 1000mL 水中充分溶解,经 0.45µm 滤膜过滤后备用。
  2. 混标储备液:准确称取柠檬黄、胭脂红、日落黄标准品各 10mg,置于 50mL 容量瓶中,用水溶解并定容,得 200µg/mL 的混标溶液。
  3. 标准混合工作液:移取不同体积的混标溶液,用流动相稀释,得到浓度分别为 100µg/mL、50µg/mL、40µg/mL、20µg/mL、10µg/mL、5µg/mL、1µg/mL 的标准系列。

3.2 样品前处理

  1. SPE 小柱的活化:使用前分别用 5mL 甲醇、5mL 去离子水活化。
  2. 上样和洗脱:准确称取饮品 2g,加入 SPE 小柱,弃去流出液;用 2mL 水和 2mL 甲醇 - 甲酸 (7:3, V/V) 溶液淋洗;后用 5mL 5% 氨化甲醇洗脱,收集洗脱液。
  3. 蒸干溶解:洗脱液在 65℃下氮气吹干,用 2mL 流动相溶解,混匀后经 0.45μm 滤膜过滤后进样。

3.3 色谱条件

流动相:A: 甲醇;B:0.02mol/L 乙酸铵溶液

色谱柱:SinoChrom ODS-BP 5µm 4.6×250mm

流速:1.0mL/min

检测波长:254nm

进样体积:10μL

柱温:30℃

4 实验结果

4.1 典型分析谱图

4.2 线性相关性

分别移取不同体积的标准储备液,配制浓度为 1µg/mL、5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL、40µg/mL、50µg/mL、100µg/mL 的标准混合工作液,按浓度由低至高进样分析,以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制校准曲线,柠檬黄、胭脂红、日落黄的线性相关性结果如下:

4.3 小检出限

本系统的基线噪声为25µV,根据3倍信噪比,仪器的小检出限分别为柠檬黄20ng/mL,胭脂红25ng/mL,日落黄18ng/mL。根据前处理方法计算,各目标物的方法检出限分别为柠檬黄20µg/kg,胭脂红25µg/kg,日落黄18µg/kg,参见表7。

4.4 实际样品分析

按照上述方法分析中国检验检疫科学研究院测试评价中心提供的饮品(样品编号16-U343),测试含量结果见表8。

4.5 加标回收率

样品中加入浓度为50µg/mL的混标溶液1mL,经过处理后分析,得到的各样品的加标回收率见表9。

5 结论

采用大连依利特公司 iChrom 5100 高效液相色谱仪,参考 GB/T 21916-2008《水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法》及 GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》并优化实验条件后,对中国能力验证中心提供的样品进行检测,结果如下:


  • 检出限:柠檬黄 20.0ng/kg、胭脂红 25.0ng/kg、日落黄 18.0ng/kg;
  • 线性关系:目标物浓度 - 峰面积曲线线性相关系数均为 1.0000,线性优良;
  • 实际样品含量:饮品中柠檬黄 20.7mg/kg、胭脂红 0.230mg/kg、日落黄 41.1mg/kg,结果获中国检科院能力验证中心认可。
  • 综上,该方法仪器灵敏度高、定性定量准确、精密度良好,能满足饮品中着色剂含量测定需求。

6 参考文献

[1] GB/T 5009.35-2003 食品中合成着色剂的测定

[2] GB/T 21916-2008 水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法

[3] GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准



7 附录



完整方案(PDF 版)下载提示

上述内容为《饮品中着色剂 HPLC 检测解决方案》全文原样呈现,完整 PDF 文档额外包含以下核心资源,点击链接即可获取:

高清资料:图 1(iChrom 5100 仪器实物图)、图 2(叠加谱图)、图 3(线性曲线)高清版(含峰形标注、数据细节)、实际饮品样品检测原始谱图;

操作指南:SPE 小柱活化 / 洗脱操作视频、氮吹仪使用教程、色谱柱维护细则;

拓展数据:不同品牌饮品(果汁、碳酸饮料、奶茶)着色剂检测对比数据、方法精密度验证报告(RSD<2%)、长期稳定性测试结果;

附录文件:GB/T 21916-2008、GB/T 5009.35-2003 标准原文节选、能力验证计划技术报告(ACAS-PT248)、耗材订货清单(色谱柱、SPE 柱、试剂型号编码)。

下载通道

直接下载:www.elitehplc.com/ 饮品着色剂 HPLC 检测方案

技术咨询:400-66-35483









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